Отчет о научно-исследовательской работе

• Введение
• Проведение микробиологических тестов на выявление степени загрязнения воздуха и поверхностей, на выявление патогенных микроорганизмов
• Изучение «противовирусного» цитокинового статуса крови человека
• Заключение

Проведение микробиологических тестов на выявление степени загрязнения воздуха и поверхностей, на выявление патогенных микроорганизмов

До и после процедуры дезинфекции с использованием установки «УльтраОзон 1.0».

Для анализа микробиологической загрязненности поверхностей установки, а также поверхностей рук человека и мобильного телефона (как одного из часто контактируемых и сильно загрязненных предметов современного человека) были использованы экспресс- тесты Петритест (ОМЧ), Петритест (Дрожжи/грибы), Петритест на стафилококк (про-во НПО «Альтернатива», г.Саратов, РФ).

Согласно инструкции производителя по применению тестов, стерильным зондом, смоченным физиологически раствором, отбирали смывы в ладонной поверхности рук испытуемых и мобильного телефона, без предварительного мытья рук и обработки спиртосодержащими или другими дезинфицирующими средствами. Повторно смывы с кожи забирались после нахождения человека в установке «УльтраОзон 1.0» от 30 до 60 секунд. После этого зонды помещались в пробирку Эппендорф 1,5 мл с 300 мкл стерильного физиологического раствора, перемешивались на вортексе и через 10 минут переносились на питательную среду. Для тестов на определение ОМЧ и стафилококка образцы термостатировались при 37°С, для определения дрожжей и грибов – при комнатной температуре (24-25°С) . Визуально первые результаты оценивали после 24 часов для ОМЧ, и через 48-72 часа для дрожжей/грибов. Плотность колоний оценивали по следующей схеме (рис.2).

При оценке общего микробного числа (ОМЧ) наблюдается снижение количества КОЕ от 40 до 75% (рис.3-8). Исходная обсеменность рук испытуемых (n=15) была выраженной и составляла – от 103 до 106. В ряде случаев наблюдалось снижение вероятного количества микроорганизмов (рассчитанное из КОЕ) на порядок, т.е. в 10 раз.

Эффективное снижение общего микробного числа на поверхности рук испытуемых наблюдается при нахождении в установке более 30 сек. При нахождении испытуемого в установке «УльтраОЗОН» 1.0 60 секунд эффект по снижению ОМЧ сравним с 30 секундами, однако следует отметить, что различная эффективность обеззараживания зависит от исходной индивидуальной обсеменности поверхности рук человека. В 3 экспериментальных сериях показано, что подавление роста стафилококка на ладонной поверхности рук человека и мобильного телефона после нахождения в установке «УльтраОЗОН» 1.0 происходит в 1,5 -2,8 раза. Рост дрожжей/ грибов также подвержен ингибированию при кратковременном (30 или 60 сек) нахождении испытуемого в установке «УльтраОЗОН» 1.0.

Наблюдаемое снижение КОЕ в микробиологических тестах с использованием подложек Петритест позволяет предполагать бактерицидный эффект совместного использования озонированного воздуха и рассеянного УФ-излучения в течение короткого периода нахождении в установке (от 30 секунд).

С целью анализа эффективного удаления нуклеиновых кислот с поверхностей и воздуха установкой УльтраОзон 1.0 была использована ДНК бактериофага лямбда (про-во ООО «Сибэнзим», Россия). Дезактивация РНК и ДНК в лабораторных условиях при работе с микроорганизмами III-IV группы патогенности с применением открытых ламп короткого УФ-излучения на длине волны 254 нм, имеющего максимальный бактерицидный эффект, успешно реализуется в ламинарных шкафах. В эксперименте использовались смывы с поверхностей ламинарного шкафа БАВ-"Ламинар-С"-1,2 (про-во «Ламинарные системы», Россия) – отрицательный контроль; смывы с поверхностей лабораторного помещения (положительный контроль); смывы с внутренней поверхности установки УльтраОзон 1.0,находившегося в режиме работы более 15 минут (пробы 1, 2, 3). На каждую их поверхностей предварительно наносили водный раствор, содержащий 36 нг/мкл ДНК бактерифага лямбда, и оставляли на 3 минуты. Внутри установки в работающем режиме аппликация раствора на корпус наносилась в верхней части (0,5 м от УФ ламп) – проба 1, средней части (1,3 м от источника УФ) – проба 2 и нижней части (2 м) – проба 3. Собранный материал анализировался методом ПЦР в реальном времени (амплификатор CFX96, BioRad, USA).

На рис. 8 представлено влияние на относительную концентрацию копируемых ампликонов ДНК бактериофага лямбда при 3-минутной экспозиции на поверхности установки «УльтраОзон 1.0».

Согласно данным литературы и информации разработчиков ламинарных шкафов, при использовании открытых УФ ламп коротковолнового излучения значительное падение УФ-интенсивности с увеличением расстояния от источника: 2 см – 9,3 мВт/см²/с, 25 см- 1,3 мВт/см²/с, 50 см – 0,7 мВт/см²/с. Вместе с тем, эффективность УФ-излучения в установке «УльтраОзон 1.0», реализованного одновременно с озонированием воздуха и поверхностей и с обеспечением циркуляции воздушного потока, безусловно, приводит к умножению дезинфицирующего эффекта.